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plot54 · 代码 0 · 图 0 · 笔记 2 · 代码库专题
4.3 可变剪切分析(rMATS)
本专题目前是蒸馏笔记型专题:保留一份完整的流程记录与关键参数,
- 分类
- bulk
- 图号
- 代码 0 · 图 0 · 笔记 2
- 文献来源
- 非期刊图,无对应论文。
- 教程来源
- 本地路径:03_Bulk转录组/4.3_可变剪切分析_rMATS
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- 代码来源
- 本地代码库 03_Bulk转录组/4.3_可变剪切分析_rMATS
图源:(自动生成占位图)
分析流程与参数
从专题 README 抽取;原文顺序保留,未跑过的部分照实标注。
表达矩阵分析回答「这个基因产生了多少 RNA」;可变剪切分析回答「这些 RNA 被拼成了什么版本」。
总表达量不变时,外显子使用与内含子保留仍可能改变,进而影响蛋白结构与产量。
本专题目前是蒸馏笔记型专题:保留一份完整的流程记录与关键参数,
没有可直接运行的脚本——原教程的核心命令行(STAR 比对、rMATS 主命令)未在文中以文本形式给出。
关键参数与含义
| 参数 |
设定值 |
说明 |
| 显著事件阈值 |
abs(IncLevelDifference) > 0.1 & FDR < 0.05 |
PSI 差值 0.1 是常用下限;改阈值只改筛选量,不改统计量 |
| 参考基因组 |
Ensembl human release-113 |
STAR 与 rMATS 的 GTF 必须同源配套,版本错配会静默产生空结果 |
--exon_s / --intron_s |
1 / 5 |
仅影响 Sashimi 图外显子块与弧线的视觉比例,不影响统计 |
--event-type |
A3SS/A5SS/MXE/RI/SE 逐类 |
五类事件各自独立出图,不能混在一个目录 |
展开其余 4 个章节(工具栈、数据格式、可视化方法、参考文献等)
文件
| 文件 |
用途 |
AI生信实战_GPT与codex运行rMATS可变剪切_上下篇合集.md |
蒸馏笔记:生物学问题、流程、工具栈、关键参数、可复制的片段(环境安装 / 结果筛选 / Sashimi 出图)、注意事项 |
流程骨架
rawdata fq (ENA PRJNA542095)
↓ STAR 2.7.x 比对 ← 原教程未给命令行
sorted BAM
↓ rMATS-turbo 4.3.0 ← 原教程未给命令行
out/{SE,A5SS,A3SS,MXE,RI}.MATS.JC.txt
↓ R 筛选 |IncLevelDifference|>0.1 & FDR<0.05
{type}_sig.txt
↓ rmats2sashimiplot --exon_s 1 --intron_s 5
Sashimi 图
溯源
使用须知
- 笔记里的路径(
/nas1/zhangj/...)是原作者服务器的私有路径,复现时需整体替换。
- 第 4 步(STAR → rMATS)在原文里只以 codex plan 模式截图出现,复现需自行补全命令行,
可参考 bioSkills 的 alternative-splicing skill。
- 该文是「AI 工作流教学」,重点是提示词与 plan 审阅流程,不是可照抄的脚本。
分析代码
这个专题只有笔记或外部工具,没有可直接展示的源码文件。